为什么要构建cdna文库

经典cDNA文库构建的基本原理是什么？

答：经典cDNA文库构建的基本原理：用Oligo（dT）作 逆转录 引物，或者用 随机引物 ，给所合成的cDNA 加上适当的连接接头，连接到适当的载体中获得cDNA文库。 其基本步骤包括：（1）mRNA的提纯获取高质量的mRNA是构建高质量的cDNA文库的 关键步骤 之一。

cDNA文库是什么？

答：cDNA文库指的是某生物某一发育时期所转录的全部mRNA反转录形成的cDNA克隆集合。

cDNA文库与基因组文库的区别是什么？

答：cDNA文库与基因组文库的区别在于cDNA文库在mRNA拼接过程中已经除去了内含子等成分，便于DNA重组时直接使用。 建立和使用基因文库是分离基因，特别是分离高等真核生物基因的有效手段。 如果一个哺乳动物的基因组是 3×109碱基对，直接从细胞中提取并分离出某一特定基因的DNA片段在技术上是很困难的。 但是在基因文库中，不同的 DNA片段都分别在不同的克隆中扩增了，只要有该基因的探针存在，则从许多克隆中筛选一个所需的克隆是一项比较简单的工作。 此外基因文库中被克隆的DNA都是基因组中各种随机的顺序片段，某些 DNA片段还包括基因外部的邻近的甚至互相跨叠的序列，所以基因文库特别有利于研究天然状态下基因的顺序组织。

cDNA文库具有组织或细胞特异性吗？

答：cDNA文库特异地反映某种组织或细胞中，在特定 发育阶段 表达的蛋白质的编码基因，因此cDNA文库具有组织或细胞 特异性 。 cDNA文库显然比 基因组DNA文库 小得多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。